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生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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反向 PCR的特點(diǎn)
日期：2025-04-30 09:45
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摘要：
常規(guī) PCR 是擴(kuò)增兩引物之間的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物來擴(kuò)增兩引物以外的 DNA 片段。
一般先用限制性內(nèi)切酶酶解 DNA(目的基因中不存在該酶的酶切位點(diǎn),且片段應(yīng)短于2～3kb),然后用連接酶使帶有黏性末端的靶片段自身環(huán)化,后用一對反向引物進(jìn)行 PCR,得到的線性 DNA 將含有兩引物外側(cè)的未知序列。該技術(shù)可對未知序列擴(kuò)增后進(jìn)行分析,如探索鄰接已知 DNA 片段的序列。
反向 PCR 已成功地用于僅知部分序列的全長 cDNA 克隆,Picter 中曾用此法擴(kuò)增基因文庫的插入 DNA。
常規(guī) PCR 是擴(kuò)增兩引物之間的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物來擴(kuò)增兩引物以外的 DNA 片段。
一般先用限制性內(nèi)切酶酶解 DNA(目的基因中不存在該酶的酶切位點(diǎn),且片段應(yīng)短于2～3kb),然后用連接酶使帶有黏性末端的靶片段自身環(huán)化,后用一對反向引物進(jìn)行 PCR,得到的線性 DNA 將含有兩引物外側(cè)的未知序列。該技術(shù)可對未知序列擴(kuò)增后進(jìn)行分析,如探索鄰接已知 DNA 片段的序列。
反向 PCR 已成功地用于僅知部分序列的全長 cDNA 克隆,Picter 中曾用此法擴(kuò)增基因文庫的插入 DNA。